Preguntas frecuentes
Información general
¿Cómo se deben procesar las muestras de heces y de suero sanguíneo?
Las muestras de heces y de sangre deben procesarse, a ser posible, en un plazo de 60 minutos. Dependiendo de la matriz de la muestra, es posible su almacenamiento provisional mediante refrigeración o congelación. Véase al respecto: Almacenamiento y manipulación
Al abrir la bolsa de aluminio, ya veo líneas de colores en el campo de lectura. ¿Se puede seguir utilizando la prueba?
Las líneas de color azul claro son importantes para el control de calidad interno y, además, pueden servir de líneas de ayuda al usuario (lugar en el que aparecen las líneas). Se eliminan durante la prueba, sin que ello afecte al resultado de la misma. La prueba es válida.
La línea de control (T) apenas se ve. ¿Es positivo el test?
Sí, incluso una línea T débil se considera un resultado positivo. La intensidad de la línea de control (C) no guarda relación con la línea de prueba.
¿Puedo utilizar pruebas que hayan estado expuestas a temperaturas extremas?
Si se sospecha que la muestra ha estado expuesta a temperaturas fuera del rango de 2 a 30 °C: comprueba el ensayo con una muestra de control (si se dispone de ella) o con el tampón de elución. No lo utilices si la línea C no aparece o si el comportamiento de la elución es atípico.
¿Cuánta caca debo usar?
Solo debe cubrirse la punta del bastoncillo de algodón con una fina capa de heces. Para ello, homogeneice la muestra de heces (por ejemplo, con una espátula de madera) y frote suavemente la superficie en al menos tres puntos con la punta del bastoncillo de algodón. Una cantidad excesiva de heces puede bloquear la prueba o teñir el fondo de un color amarillento-marronáceo.
¿Cuánto tiempo puede permanecer la muestra en el tubo de tampón?
Máximo 5 minutos. Mejor aún: mezclar bien la punta del bastoncillo con heces en el tampón y aplicar la solución recién preparada directamente sobre la prueba.
¿Puedo combinar muestras de diferentes fuentes (por ejemplo, heces y orina)?
¿Puedo humedecer el bastoncillo de algodón con solución tampón antes de usarlo?
Sí, sobre todo en el caso de heces desmenuzadas, esto es posible y resulta muy útil. De esta forma, el material se adhiere mejor al bastoncillo de algodón y se transfiere con mayor facilidad.
Almacenamiento y manipulación
Si es necesario realizar una prueba diferida:
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Conservar las heces en la nevera (4-8 °C) durante un máximo de 3 días; para un almacenamiento provisional más prolongado, congelarlas
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El suero y el plasma se conservan estables refrigerados hasta 48 h; para un almacenamiento intermedio más prolongado, se deben congelar
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La sangre completa se mantiene estable hasta 48 horas únicamente refrigerada; no es posible congelarla.
Control de la temperatura:
- A temperaturas inferiores a 2 °C o superiores a 30 °C, el rendimiento de la prueba y el efecto tampón pueden verse afectados.
- Dejar que alcance la temperatura ambiente antes de comenzar la prueba. Las pruebas demasiado frías pueden provocar líneas débiles o tardías.
Vida útil de la solución tampón:
Una vez abierto y mezclado, utilízalo en un plazo de 30 minutos. El líquido tampón usado puede afectar al resultado de la prueba.
Transporte de muestras:
Si es necesario transportar las muestras, guárdalas en frío para mantener la estabilidad del antígeno.
Indicaciones específicas sobre las muestras
Muestras de sangre completa: ¿qué hay que tener en cuenta?
Para evitar que la sangre se desborde o se bloquee la prueba, espere a que la sangre se haya absorbido por completo antes de añadir el tampón de análisis. Especialmente en el caso de sangre muy espesa o viscosa, añadir el tampón demasiado pronto puede alterar la prueba.
Muestras hemolíticas, ictéricas o lipémicas:
Su uso puede provocar una coloración de fondo que dificulte el análisis e influya en los resultados. Las muestras lipémicas pueden afectar a los resultados de la prueba, ya que la grasa puede bloquear el acoplamiento Ag/AK, lo que puede dar lugar a resultados falsos negativos.
Pruebas con arena para gatos:
Las heces tratadas químicamente presentes en la mezcla de muestra y tampón pueden falsear el resultado de la prueba, por lo que se debe evitar tomar muestras de zonas contaminadas. Lo mejor es dividir la muestra de heces por la mitad y tomar la muestra de la parte central.
Procedimiento de prueba y problemas de funcionamiento
La prueba no funciona o se ralentiza:
Posibles causas: muestra demasiado espesa, cantidad excesiva, mucosidad o impurezas.
Solución:
- Muestra de heces: pasar la punta del bastoncillo de algodón solo por la superficie; si es necesario, añadir unas gotas de líquido tampón transparente.
- Suero: no analizar muestras hemolíticas, lipémicas o ictéricas.
- Muestras de sangre completa: dejar que la sangre se absorba por completo en el campo de muestra antes de añadir el tampón. (Pueden producirse retrasos si la sangre es muy espesa).
Líquido oscuro y/o demasiado espeso en el tubo de muestra:
Indicación de exceso de heces. Diluir o utilizar menos material para garantizar un funcionamiento limpio y evitar que aparezcan líneas marrones. Como alternativa, colocar la botella tampón boca abajo, dejar que los componentes más pesados se sedimenten y desechar la primera gota.
La línea de prueba aparece sin la línea de control:
La prueba no es válida; por favor, repítala. Preste atención a cualquier anomalía en la muestra o durante la realización de la prueba.
Fecha de la lectura:
Lee los resultados exactamente dentro del intervalo de tiempo indicado. Una lectura tardía suele provocar líneas de sombra inespecíficas (¡artefactos por evaporación!).
Cómo leer los resultados transcurridos 10 minutos:
- Solo son válidas las líneas que aparezcan dentro del intervalo de 10 minutos Y que se mantengan.
- Las líneas que desaparezcan antes de que finalice el plazo o que aparezcan solo después de 10 minutos no se tendrán en cuenta.
Notas técnicas
Problemas habituales en las pruebas de antígenos:
- La mezcla de muestra y tampón es demasiado espesa, lo que dificulta la obtención de un resultado limpio; se recomienda
- Solución: no sumergir completamente la punta del bastoncillo de algodón en las heces, sino frotar suavemente varias zonas de la superficie, de modo que solo quede cubierta la punta.
- Momento inadecuado para la prueba: La muestra se tomó en un momento en el que la enfermedad aún no era detectable o ya no lo era, p. ej., FeLV (los antígenos solo son detectables entre 2 y 4 semanas después de la infección) o CPV/FPV (período de excreción muy corto, de unos 3 a 10 días).
- Realización de la prueba inmediatamente después de un tratamiento: por ejemplo, tras un tratamiento, el animal sigue excretando giardias muertas durante unas 3 semanas. Las pruebas rápidas no distinguen entre giardias vivas y muertas.
- Las vacunas vivas, como por ejemplo las contra el parvovirus, pueden detectarse mediante la prueba de antígenos hasta tres semanas después.
Problemas frecuentes en las pruebas de anticuerpos:
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Momento inadecuado para la prueba: la formación de anticuerpos tras una infección puede tardar un tiempo variable en función del agente patógeno (véase «Enfermedades del viajero»)
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¡No se debe realizar la prueba inmediatamente después de la vacunación (especialmente en el caso de las vacunas vivas)! La seroconversión lleva tiempo (normalmente entre 3 y 4 semanas tras la última dosis).
Sensibilidad, especificidad y rendimiento total de la prueba (TTP):
- Sensibilidad: capacidad de identificar correctamente a los animales enfermos como positivos.
- Especificidad: capacidad de identificar correctamente a los animales sanos como negativos.
- TTP: fiabilidad global de la prueba, que tiene en cuenta la sensibilidad y la especificidad.
Tipos de muestras y restricciones
Evitar mezclar diferentes matrices de muestra:
- Heces + orina u otras sustancias → reacciones inesperadas, prueba alterada.
Tipos especiales de muestras:
- Lipémico, hemolítico o ictérico: puede intensificar la tinción de fondo y/o alterar el flujo, lo que dificulta la interpretación.
- Heces desmenuzadas o muy desmigajadas: humedece el tampón para recoger la muestra en un bastoncillo de algodón.
Sustancias extrañas:
Arena para gatos, lecho o restos de comida → resultados falsos. Utiliza siempre muestras de heces limpias.
Indicaciones adicionales para los propietarios de animales y las clínicas veterinarias
Portadores crónicos:
- Algunos animales (Giardia, parvovirus, FeLV) pueden excretar antígenos o anticuerpos durante un periodo prolongado o de forma intermitente.
- La interpretación puede requerir, en su caso, varias pruebas a lo largo del tiempo.
Cita para la vacunación frente a prueba de detección:
- Tras la administración de una vacuna viva, la prueba de antígenos puede dar un resultado positivo de forma temporal.
- Tiempo de espera tras la vacunación con vacunas vivas: pruebas de antígenos (p. ej., parvovirus): al menos 2-3 semanas; pruebas de anticuerpos: aprox. 2-4 semanas, dependiendo de la vacuna.
Información sobre zoonosis:
- Cryptosporidium o Giardia → Las personas también pueden infectarse. Es importante mantener una buena higiene.
Toma de muestras y manipulación
Posibles causas por las que la prueba no se ejecuta o se interrumpe:
- A menudo, los microporos de la membrana de nitrocelulosa están obstruidos o se ha aplicado una cantidad excesiva de heces en el campo de muestra. Nota: Algunas almohadillas de muestra son más gruesas y pueden filtrar peor las muestras muy espesas o el exceso de material.
Homogeneización de la muestra:
- En el caso de las muestras de heces, se recomienda homogeneizar brevemente la muestra antes de recogerla (por ejemplo, con una espátula de madera)
- Ventaja: aumenta la probabilidad de detectar realmente los antígenos presentes en la muestra.
Cantidad de la muestra:
- Una cantidad excesiva de la mezcla de heces y solución tampón puede alterar la línea de prueba y/o impedir que se desarrolle la reacción; una cantidad insuficiente puede dar lugar a resultados falsos negativos.
- Consejo: humedece siempre la punta del bastoncillo de algodón, sin sumergirlo por completo.
Cómo actuar ante heces muy líquidas o acuosas:
- En caso de diarrea muy líquida, el virus o el antígeno pueden eliminarse con el lavado intestinal → la prueba da negativo en un primer momento, aunque exista infección.
- Solución: tras la diarrea acuosa, esperar 30 minutos y utilizar las heces más sólidas (→ efecto de dilución).
Prevención de la contaminación:
- Utilizar guantes y mantener limpios los recipientes de muestras.
- La contaminación cruzada (por ejemplo, entre animales) puede dar lugar a resultados falsos positivos.
Interpretación de los resultados
Líneas de prueba tenues:
- Las líneas T débiles, pero visibles dentro del periodo de lectura, se consideran positivas. En caso de línea débil y ausencia de sospecha clínica: considerar la repetición de la prueba y/o pruebas de confirmación (p. ej., PCR, Western blot).
- La intensidad de la línea de control no influye ni tiene relevancia para la línea de prueba.
Combinación de los resultados de las pruebas:
- Si se sospecha una infección crónica o recurrente, puede ser conveniente realizar pruebas de detección de agentes patógenos diferenciales por precaución (por ejemplo: Giardia y CPE o Giardia y Cryptosporidium).
- Ejemplo: Giardia o parvovirus: un resultado negativo en una prueba individual no significa necesariamente que «no haya ningún agente patógeno presente».
Fecha de la prueba:
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Muchas pruebas de antígenos y anticuerpos tienen unos plazos concretos en los que se puede detectar la infección.
- Por ejemplo, antígeno del parvovirus: periodo de aproximadamente 7 a 10 días; excreción del virus entre 3 y 4 días después de la infección y antes de la aparición de los síntomas
- Por ejemplo, antígeno del virus del moquillo: detectable en la sangre durante 3-4 días y, posteriormente, en las heces durante unos 3 días más
- Pruebas realizadas demasiado pronto → resultados falsos negativos.
- Pruebas demasiado tardías (p. ej., tras la excreción del virus) → también dan resultados falsos negativos.
Pruebas de repaso:
- Resulta especialmente útil tras un tratamiento o una vacunación para supervisar la evolución.
- Pero cuidado: las vacunas vivas pueden detectarse en las pruebas rápidas (por ejemplo, el antígeno del parvovirus tras la vacunación). ¡Ten en cuenta el tiempo de espera!
Consejos para las muestras de heces
- Sumergir únicamente la punta del bastoncillo de algodón (el tercio delantero de la cabeza del bastoncillo) en las heces
- Una vez homogeneizada la heces, tomar muestras superficiales en al menos tres puntos
- Evite que la suspensión quede demasiado espesa (por ejemplo, debido a mucosidad u otras impurezas), ya que, de lo contrario, se obstruirán los microporos de nitrocelulosa
- Si, a pesar de todo, entraran partículas gruesas en el frasco de tampón: dar la vuelta al frasco de tampón, dejar que las partículas gruesas se sedimenten y desechar la primera gota.
- Si el proceso se atasca, añadir unas gotas de tampón limpio si es necesario o repetir la prueba.