Veelgestelde vragen
Algemeen
Hoe moeten de ontlastings- en bloed-serummonsters worden verwerkt?
Ontlastings- en bloedmonsters moeten zo mogelijk binnen 60 minuten worden verwerkt. Afhankelijk van de monstermatrix is tussentijdse opslag door koeling of invriezing mogelijk. Zie hiervoor: Opslag & hantering
Nadat ik het aluminium zakje heb geopend, zie ik in het uitleesvenster al gekleurde strepen. Is de test nog bruikbaar?
De lichtblauwe lijnen zijn belangrijk voor de interne kwaliteitscontrole en kunnen bovendien als hulplijnen dienen voor de gebruiker (plaats waar de lijnen ontstaan). Ze worden tijdens de testcyclus weggewassen, zonder dat dit invloed heeft op de test. De test is bruikbaar.
De testlijn (T) is slechts vaag zichtbaar. Is de test positief?
Ja, zelfs een vage T-lijn wordt als positief beschouwd. De intensiteit van de controlelijn (C) hangt niet samen met die van de testlijn.
Kan ik tests gebruiken die aan extreme temperaturen zijn blootgesteld?
Bij vermoeden van blootstelling aan temperaturen buiten het bereik van 2-30 °C: controleer de test met een controlemonster (indien beschikbaar) of met de loopbuffer. Niet gebruiken bij uitval van de C-lijn of bij atypisch loopgedrag.
Hoeveel uitwerpselen moet ik gebruiken?
Alleen het uiteinde van het wattenstaafje mag bedekt zijn met een dun laagje ontlasting. Meng hiervoor het ontlastingsmonster goed door (bijvoorbeeld met een houten spatel) en dep het oppervlak op minimaal 3 plaatsen lichtjes aan met het uiteinde van het wattenstaafje. Te veel ontlasting kan de test blokkeren of de achtergrond geelachtig-bruin verkleuren.
Hoe lang mag het monster in het bufferbuisje blijven zitten?
Max. 5 minuten. Beter: meng de kop van het wattenstaafje met de ontlasting goed door de buffer en breng de verse oplossing direct op de test aan.
Kan ik monsters uit verschillende bronnen (bijvoorbeeld ontlasting en urine) combineren?
Kan ik het wattenstaafje van tevoren met buffer bevochtigen?
Ja, vooral bij kruimelige ontlasting is dit mogelijk en erg handig. Het materiaal blijft zo beter aan het wattenstaafje plakken en kan gemakkelijker worden overgebracht.
Opslag en hantering
Als uitgesteld testen noodzakelijk is:
-
Bewaar ontlasting maximaal 3 dagen in de koelkast (4–8 °C); voor langere tussentijdse opslag invriezen
-
Serum/plasma blijft tot 48 uur gekoeld stabiel; voor langere tussentijdse opslag invriezen
-
Volledig bloed is uitsluitend gekoeld stabiel tot 48 uur; invriezen is niet mogelijk
Temperatuurregeling:
- Bij temperaturen onder 2 °C of boven 30 °C kunnen de testprestaties en het buffereffect worden beïnvloed.
- Breng de test vóór aanvang op kamertemperatuur. Te koude tests kunnen vage of vertraagde lijnen veroorzaken.
Houdbaarheid van de bufferoplossing:
Na het openen en mengen binnen 30 minuten gebruiken. Oude bufferoplossing kan de testresultaten beïnvloeden.
Vervoer van monsters:
Als monsters moeten worden vervoerd, bewaar ze dan gekoeld om de stabiliteit van het antigeen te behouden.
Speciale aanwijzingen voor monsters
Volledige bloedmonsters – waar moet je op letten?
Om te voorkomen dat er volbloed naar boven komt of dat de test wordt geblokkeerd, moet u wachten tot het bloed volledig is opgezogen voordat u de loopbuffer toevoegt. Vooral bij zeer dik of stroperig bloed kan een te vroege toevoeging de test verstoren.
Hämolytische, icterische of lipemische monsters:
Het gebruik hiervan kan een achtergrondkleuring veroorzaken, waardoor de analyse wordt bemoeilijkt en de resultaten worden beïnvloed. Lipemische monsters kunnen de testresultaten beïnvloeden, aangezien het vet de Ag/AK-koppeling kan blokkeren, wat vals-negatieve resultaten tot gevolg kan hebben.
Proeven met kattenbakvulling:
Chemisch behandelde strooisel in het mengsel van monster en buffer kan de testresultaten beïnvloeden; daarom moet het nemen van monsters uit verontreinigde gebieden worden vermeden. Beter: splits het ontlastingsmonster in het midden en neem het monster uit het binnenste deel.
Testprocedure & problemen tijdens het draaien
De test werkt niet of loopt vast:
Mogelijke oorzaken: te dikvloeibaar monster, te grote hoeveelheid, slijm/verontreinigingen.
Oplossing:
- Ontlastingsmonster: dep de punt van het wattenstaafje slechts oppervlakkig, druppel indien nodig wat heldere bufferoplossing erbij.
- Serum: test geen hemolytische, lipemische of icterische monsters.
- Volledebloedmonsters: wacht even zodat het bloed volledig in het monsterveld kan intrekken voordat de buffer wordt toegevoegd. (Bij stroperig bloed kan dit enige tijd duren).
Donkere en/of te stroperige vloeistof in het proefbuisje:
Dit duidt op een te grote hoeveelheid uitwerpselen. Verdun het mengsel of gebruik minder materiaal om een soepele werking te garanderen en bruine strepen te voorkomen. Je kunt ook de bufferfles ondersteboven houden, de zware bestanddelen laten bezinken en de eerste druppel weggooien.
De testlijn verschijnt zonder controlelijn:
De test is ongeldig. Voer de test alstublieft opnieuw uit. Let op eventuele afwijkingen in het monster of tijdens het testen.
Tijdstip van de meting:
Lees de resultaten precies binnen het aangegeven tijdsbestek af. Te laat aflezen leidt vaak tot onspecifieke schaduwlijnen (verdampingsartefacten!).
Resultaten na meer dan 10 minuten aflezen:
- Alleen lijnen die binnen het venster van 10 minuten verschijnen EN blijven bestaan, zijn geldig.
- Lijnen die vóór het verstrijken van de tijd verdwijnen of pas na 10 minuten verschijnen, tellen niet mee.
Technische opmerkingen
Veelvoorkomende problemen bij antigeentests:
- Het mengsel van monster en buffer is te stroperig, waardoor een zuivere test moeilijker wordt;
- Oplossing: Dompel de kop van het wattenstaafje niet volledig in de ontlasting, maar dep op verschillende plaatsen oppervlakkig, zodat alleen de punt bedekt is.
- Verkeerd testmoment: Het monster is afgenomen op een moment waarop de ziekte nog niet of niet meer aantoonbaar is, bijv. FeLV (antigenen zijn pas 2 tot 4 weken na infectie aantoonbaar) of CPV/FPV (zeer korte uitscheidingsperiode van ca. 3-10 dagen)
- Testen direct na een behandeling: d.w.z. gedode Giardia worden na een behandeling nog ca. 3 weken door het dier uitgescheiden. Sneltests maken geen onderscheid tussen levende en dode Giardia.
- Levende vaccins, zoals bijvoorbeeld tegen het parvovirus, kunnen tot wel 3 weken later nog door de antigeentest worden gedetecteerd.
Veelvoorkomende problemen bij antilichaamtests:
-
Verkeerd testmoment: de aanmaak van antistoffen na een infectie kan, afhankelijk van de ziekteverwekker, verschillende tijd in beslag nemen (zie: reisziekten)
-
Afhankelijk van het vaccin (met name bij levende vaccins) niet direct testen! De seroconversie heeft tijd nodig (meestal 3–4 weken na de laatste dosis).
Gevoeligheid, specificiteit en totale testprestatie (TTP):
- Gevoeligheid: het vermogen om zieke dieren correct als positief te herkennen.
- Specificiteit: het vermogen om gezonde dieren correct als negatief te herkennen.
- TTP: totale betrouwbaarheid van de test, waarbij rekening wordt gehouden met de sensitiviteit en specificiteit.
Soorten monsters & beperkingen
Vermijd het combineren van verschillende monstermatrixen:
- Ontlasting + urine of andere stoffen → onverwachte reacties, testprocedure verstoord.
Bijzondere soorten monsters:
- Lipemisch, hemolytisch of icterisch: kan de achtergrondkleur versterken en/of de loop verstoren, waardoor de beoordeling wordt bemoeilijkt.
- Brokkige of zeer kruimelige ontlasting: bevochtig het staafje om het materiaal op het wattenstaafje op te nemen.
Vreemde stoffen:
Kattenbakvulling, strooisel/deeltjes uit de bodem of voerresten → vervalst de testlijn. Gebruik altijd zuivere ontlastingsmonsters.
Aanvullende informatie voor eigenaren van huisdieren/dierenartsenpraktijken
Chronische dragers:
- Sommige dieren (Giardia, Parvo, FeLV) kunnen antigenen of antilichamen gedurende een langere periode of met tussenpozen uitscheiden.
- Voor de interpretatie zijn eventueel meerdere tests in de loop van de tijd nodig.
Vaccinatieafspraak versus test:
- Na toediening van een levend vaccin kan de antigeentest tijdelijk positief uitvallen.
- Wachttijd na toediening van een levend vaccin: antigeentests (bijv. parvo): min. 2-3 weken; antilichaamtests: ca. 2-4 weken, afhankelijk van het vaccin.
Informatie over zoönosen:
- Cryptosporidia of Giardia → Ook mensen kunnen besmet raken. Let op de hygiëne.
Monsterafname en verwerking
Mogelijke oorzaken waarom de test niet wordt uitgevoerd of vastloopt:
- Vaak zijn de microporiën van het nitrocellulosemembraan verstopt of is er te veel ontlasting op het monsterveld aangebracht. Opmerking: Sommige monsterpads zijn dikker en kunnen stroperige monsters of te veel materiaal minder goed filteren.
Homogenisatie van het monster:
- Bij ontlastingsmonsters is het raadzaam om het monster vóór het afnemen kort te homogeniseren (bijvoorbeeld met een houten spatel)
- Voordeel: de kans dat de antigenen in het monster daadwerkelijk worden gedetecteerd, neemt toe.
Hoeveelheid van het monster:
- Te veel uitwerpselen/buffer-mengsel kan de testlijn vervalsen en/of de test belemmeren; te weinig kan leiden tot vals-negatieve resultaten.
- Tip: Maak altijd alleen het uiteinde van het wattenstaafje nat, dompel het niet volledig onder.
Omgaan met zeer vloeibare of waterige ontlasting:
- Bij zeer vloeibare diarree kunnen virussen/antigenen worden weggespoeld → de test is in eerste instantie negatief, hoewel er wel sprake is van een infectie.
- Oplossing: na waterige diarree 30 minuten wachten en stevigere ontlastingsresten gebruiken (→ verdunningseffect).
Voorkoming van besmetting:
- Gebruik handschoenen en houd de monsterbussen schoon.
- Kruisbesmetting (bijvoorbeeld tussen dieren) kan vals-positieve resultaten opleveren.
Interpretatie van de resultaten
Vage teststrepen:
- Zwakke T-lijnen die binnen de afleestijd zichtbaar zijn, worden als positief beschouwd. Bij een zwakke lijn en bij afwezigheid van klinische verdenking: overweeg een herhalingstest en/of bevestigingsdiagnostiek (bijv. PCR, Western Blot).
- De intensiteit van de controlelijn heeft geen invloed op of betekenis voor de testlijn.
Combinatie van testresultaten:
- Bij een vermoeden van een chronische of terugkerende infectie kan het zinvol zijn om voor de zekerheid te testen op andere mogelijke ziekteverwekkers (bijvoorbeeld: Giardia en CPE of Giardia en Cryptosporidium).
- Voorbeeld: Giardia of parvo – een negatieve afzonderlijke test betekent niet noodzakelijkerwijs dat er „geen ziekteverwekker aanwezig is“.
Tijdstip van de test:
-
Veel antigeen-/antilichaamtests hebben een bepaalde tijdsperiode waarin een infectie aantoonbaar is.
- Bijvoorbeeld parvovirus-antigeen: periode van ca. 7-10 dagen; uitscheiding van virussen 3-4 dagen na infectie en vóór het optreden van de symptomen
- bijv. distempervirus-antigeen: 3–4 dagen aantoonbaar in besmettelijk bloed en vervolgens ca. 3 dagen daarna in de ontlasting
- Te vroege tests → vals-negatieve resultaten.
- Te late tests (bijv. na uitscheiding van het virus) → eveneens vals-negatief.
Herhalingstoetsen:
- Vooral na een behandeling of vaccinatie nuttig om het verloop te volgen.
- Maar let op: levende vaccins kunnen door sneltests worden gedetecteerd (bijv. parvovirusantigeen na vaccinatie). Houd rekening met de wachttijd!
Tips voor ontlastingsmonsters
- Dompel alleen het uiteinde van het wattenstaafje (het voorste derde deel van het wattenkopje) in de ontlasting
- Nadat de ontlasting homogeen is geworden, op ten minste drie plaatsen oppervlakkig afvegen
- Vermijd een te dikke suspensie (bijv. door slijm of andere verontreinigingen), anders raken de microporiën van de nitrocellulose verstopt
- Mocht er toch grof materiaal in de bufferfles terechtkomen: draai de bufferfles ondersteboven, laat grove deeltjes bezinken en gooi de eerste druppel weg.
- Als het proces vastloopt, indien nodig wat heldere buffer bijvullen of de test herhalen.