Fonctionnement d'un test à flux latéral
Les tests immunochromatographiques rapides (également appelés « tests à flux latéral ») ont été initialement mis au point à la fin des années 1980 pour détecter de manière rapide et simple les grossesses. Depuis lors, cette méthode, qui ne nécessite ni personnel qualifié ni équipement de laboratoire spécifique, et qui est en outre rapide à mettre en œuvre et peu coûteuse, s’est solidement imposée dans le domaine du diagnostic sur site, en particulier en médecine humaine. Dans le domaine vétérinaire également, le diagnostic sur site est déjà une réalité grâce aux systèmes de tests immunochromatographiques rapides, que nous continuons à développer et à mieux implanter chez Fassisi®.
Nos systèmes de tests immunochromatographiques rapides se composent généralement d’un tampon d’échantillonnage, d’un tampon de conjugué, d’une matrice de réaction et d’un tampon absorbant ou à mèche.
Comme le montre l’illustration, les différents composants se chevauchent et sont fixés sur une carte spéciale.
L'échantillon est d'abord déposé sur le tampon « Sample-Pad », qui le prépare en vue de la suite du test : on utilise ici, par exemple, des matériaux qui effectuent une séparation du sang total, de sorte que seul le plasma sanguin parvienne au deuxième composant du test, le tampon « Conjugate-Pad ». Un conjugué particulaire y a été immobilisé. Ces particules sont le plus souvent des particules d’or auxquelles a été couplé un composant biologique spécifique (un antigène ou un anticorps) du test.
Dès que l’échantillon entre en contact avec le tampon de conjugaison, il met le conjugué en solution et permet ainsi une réaction entre l’analyte et le premier composant biologique. Ce complexe, formé de l'analyte et du premier composant biologique, migre ensuite vers le troisième élément du test à flux latéral, la matrice de réaction.
Celle-ci est constituée d’une membrane poreuse sur laquelle d’autres composants biologiques ont été déposés sous la forme d’une ligne de test et d’une ligne de contrôle. La ligne de test est constituée de protéines (antigènes ou anticorps) qui fixent le complexe formé par l'analyte et le premier composant biologique sur la membrane, générant ainsi un signal coloré. Les particules conjuguées qui ne se sont pas liées à l’analyte continuent leur migration vers la ligne de contrôle, qui se compose généralement d’un anticorps anti-immunoglobuline spécifique à l’espèce, réagissant avec l’anticorps du conjugué et produisant toujours un signal coloré, quel que soit le résultat de la ligne de test. Le quatrième composant du test à flux latéral est le tampon absorbant, qui aspire le liquide de la matrice de réaction et assure ainsi le flux depuis le tampon d’échantillon vers le tampon de conjugué, puis vers la membrane.
Ces systèmes de tests rapides directs sont utilisés lorsque l’on souhaite détecter des analytes de grande taille comportant plusieurs déterminants antigéniques, comme c’est le cas par exemple pour la détection du parvovirus avec notre test Fassisi ParCo. Dans ce cas, un résultat positif est indiqué par l’apparition d’une ligne de test et d’une ligne de contrôle.
La vidéo illustre le fonctionnement d'un test « sandwich » dans lequel l'analyte est présent dans l'échantillon, ce qui entraîne l'apparition d'un signal coloré à la fois sur la ligne de test et sur la ligne de contrôle.